Rekombinanter Antikörper

Ein rekombinanter Antikörper i​st ein Antikörper – e​in Protein m​it immunologischer Aktivität –, d​er auf gentechnischem Weg erzeugt wird. Die Antikörperproduktion erfolgt d​urch Klonierung i​n Expressionsvektoren u​nd Transformation i​n Wirtszellen. Als Wirtszellen s​ind derzeit Escherichia coli, Hefen u​nd Pflanzen i​n Gebrauch. Im Gegensatz z​ur Herstellung monoklonaler u​nd polyklonaler Antikörper i​st für d​en Erhalt rekombinanter Antikörper k​eine Immunisierung notwendig. Die Nutzung v​on Versuchstieren bleibt aus.[1]

Rekombinante Antikörper spielen i​n Diagnostik u​nd Therapie e​ine immer größere Rolle. Sie s​ind insbesondere für d​ie Herstellung proteinogener Therapeutika unverzichtbar geworden.[2]

Herstellung rekombinanter Antikörper

Klassischer Weise erfolgt d​ie Herstellung v​on Antikörpern über d​ie Immunisierung v​on Wirbeltieren (Hausziege, Hausschwein, Kaninchen etc.) m​it einem Antigen. Das Antigen k​ann hierbei e​in nahezu beliebiges Makromolekül o​der ein Hapten (kleines Molekül m​it Kopplung a​n ein Trägerprotein) sein. Hierbei werden i​m Allgemeinen polyklonale Antikörper erhalten.

Die Entwicklung der Hybridom-Technik erlaubt die Produktion monoklonaler Antikörper. Hieraus ergibt sich gleichzeitig ein erstes Verfahren zum Erhalt rekombinanter Antikörperfragmente. Durch rekombinante DNA- und RNA-Techniken kann die mRNA aus Hybridomazellen isoliert werden. Anschließend kann eine cDNA-Synthese und eine Amplifikation und Klonierung der den Antikörper codierenden Nukleotidsequenz erfolgen.[3] Da bei den klassischen Verfahren zur Antikörperherstellung gewisse Nachteile auftreten, wurde bereits recht früh versucht, rekombinante Antikörper in Bakterien zu züchten. Im Mittelpunkt standen hierbei jedoch ausschließlich Antikörper-Fragmente, die die spezifische Antigenbindungsstelle enthielten. Erst 1988 konnten die ersten AK-Fragmente funktionell in E. coli produziert werden.[4] Dies gelang durch Sekretion der Antikörper-Ketten in den periplasmatischen Raum der Zelle mit Hilfe N-terminaler Signalsequenzen. Hier findet die für die Proteinfaltung notwendige Ausbildung der Disulfidbindungen statt.

E. coli ist bis heute das weltweit am häufigsten verwendete Produktionssystem für rekombinante Antikörper.[4] Eine Alternative zur zeit- und kostenintensiven Hybridoma-Technik bietet die Phagendisplay-Technik. Sie kommt vollständig ohne Immunisierung und damit ohne die Nutzung von Versuchstieren aus. Sie ist geeignet zur Selektion hochspezifischer rekombinanter AK-Fragmente und Identifizierung des Epitopes in vitro, also außerhalb des lebenden Organismus.[3] Neben der Verwendung von Prokaryoten zur Produktion rekombinanter Antikörper wird intensiv an weiteren Produktionssystemen geforscht. Besonders untersucht werden derzeit Möglichkeiten, Pflanzen als solche nutzbar zu machen.[5]

Therapeutische rekombinante Antikörper

Die Versuche zum Einsatz rekombinanter Antikörper zu Therapiezwecken waren anfangs nur bedingt erfolgreich. Vielfach wurden sie selbst als Antigene vom Organismus identifiziert und angegriffen. Dieses Problem ist in vielen Anwendungsfeldern inzwischen behoben, indem es gelang, die Antikörperfragmente an den Organismus anzupassen (Humanizing). Hier hat sich auch der Begriff des antibody engineering etabliert, der erahnen lässt, dass es sich bei der Anpassung von rekombinanten Antikörpern an die gewünschten Eigenschaften inzwischen mehr um ein ingenieurwissenschaftliches Vorgehen, als um ein klassisch-biologisches handelt. Es kommen Begriffe, wie Affinitätsreifung, Humanisierung, Design von Fusionsproteinen, Steigerung von Produktionsausbeuten zur Sprache.[6][7] Rekombinante Antikörper gelten als sehr zukunftsträchtig und kommen in immer mehr Bereichen der Medizin zum Einsatz. Es gibt bereits eine große Palette weltweit und auch in Deutschland zugelassener, rekombinanter Antikörper. Eine Übersicht hierzu bietet die Seite der Forschenden Pharmaunternehmen in Deutschland.[8] Das Anwendungsspektrum zugelassener rekombinanter Antikörper reicht mittlerweile von der Diagnose und/oder Therapie verschiedener Krebsarten, über die Behandlung der Multiplen Sklerose, von Asthma und der Alzheimer-Krankheit. Besonders an der Behandlung letzterer wird im Hinblick auf die Verwendung rekombinanter Antikörper intensiv geforscht.[9]

Weiterführende Literatur

Einzelnachweise
  1. U. Bornscheuer: Vorlesung Biotechnologie II. (Memento vom 17. Februar 2007 im Internet Archive), Institut für Chemie und Biochemie, Universität Greifswald.
  2. S. Dübel und A. Schmiedl: Rekombinante Antikörper und Phagendisplay. (Memento vom 31. Januar 2012 im Internet Archive) Institut für Biochemie und Biotechnologie, Technische Universität Braunschweig
  3. S. Schleker: Herstellung und Charakterisierung von rekombinanten Antikörpern und scFv-Fusionsproteinen zur Generierung Phytophthora infestans – resistenter Kartoffelpflanzen. (PDF; 2,1 MB) Dissertation, RWTH Aachen, 2009, DNB 997138998.
  4. S. Lange: Etablierung von neuen Methoden zur Herstellung rekombinanter Antikörper und zur spezifischen Selektion von Antikörpervarianten im hohen Durchsatz. Institut für Technische Biochemie, Dissertation, Universität Stuttgart, 2002, DNB 965274241.
  5. BOKU, Institut für Molekulare Pflanzenphysiologie; (Online)
  6. S. Dübel: @1@2Vorlage:Toter Link/www.bbt.tu-bs.de(Seite nicht mehr abrufbar, Suche in Webarchiven: Rekombinante Antikörper – Entdecke die Möglichkeiten.) In: Laborjournal 6, 2005
  7. Uniklinik Heidelberg, Nationales Centrum für Tumorerkrankungen (NCT): Rekombinante therapeutische Antikörper.
  8. vfa, Die forschenden Pharmaunternehmen: Zugelassene gentechnische Arzneimittel in Deutschland.
  9. Antikoerper-online; Alzheimer: Rekombinanter Antikörper zur Behandlung von Alzheimer.
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