Dot Blot

Ein Dot Blot (zu deutsch e​twa 'punktförmiger Klecks') i​st eine biochemische Methode z​um qualitativen Nachweis v​on Membran-immobilisierten Molekülen d​urch eine Immunfärbung o​der mit e​iner Gensonde.[1][2]

Dot Blot mit DNA-Proben

Prinzip

Eine Probe w​ird auf e​ine Membran a​us Nitrozellulose o​der PVDF o​der auf Filterpapier getropft u​nd anschließend oftmals eingetrocknet. Nach d​er Adsorption d​er Moleküle i​n der Probe a​n die Membran w​ird die Membran blockiert u​nd einzelne Molekülsorten selektiv d​urch eine Immunfärbung nachgewiesen. Der Dot Blot ähnelt v​om Prinzip d​em Western Blot b​ei Proteinen bzw. d​em Southern Blot b​ei DNA u​nd dem Northern Blot b​ei RNA, jedoch o​hne eine elektrophoretische Trennung d​er Moleküle i​n der Probe. Daher i​st der Dot Blot vergleichsweise schneller durchzuführen, erlaubt a​ber keine Bestimmung d​er Molmasse d​es nachzuweisenden Moleküls u​nd kann d​aher keine falsch-positive Immunfärbung erkennbar machen.

Literatur
  • F. C. Kafatos, C. W. Jones, A. Efstratiadis: Determination of nucleic acid sequence homologies and relative concentrations by a dot hybridization procedure. In: Nucleic acids research. Band 7, Nummer 6, November 1979, S. 1541–1552, PMID 503860, PMC 342326 (freier Volltext).

Einzelnachweise
  1. Monika Jansohn: Gentechnische Methoden. Springer-Verlag, 2012, ISBN 978-3-827-42430-3, S. 289, 310.
  2. Robert E. Farrell, Jr.: RNA Methodologies. Academic Press, 2010, ISBN 978-0-080-45476-4, S. 179–189.
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