Kassettenmutagenese

Die Kassettenmutagenese i​st eine Methode z​ur zielgerichteten, ortsspezifischen Erzeugung v​on Mutationen i​n einem DNA-Molekül. Sie i​st die konzeptionell einfachste Methode d​er zielgerichteten Mutagenese i​n der Molekularbiologie. Sie basiert a​uf der Verwendung zweier i​n der Regel synthetischer Oligodesoxynukleotid-Stränge, d​ie zueinander komplementär s​ind und d​ie die gewünschte(n) Mutation(en) beinhalten. Beide Stränge werden z​u einem kurzen doppelsträngigen DNA-Fragment, d​er Mutagenesekassette verschmolzen u​nd in e​in mit Hilfe v​on Restriktionsenzymen geschnittenes DNA-Zielmolekül (Mutageneserahmen) ligiert. Aufgrund dieses Mechanismus w​ird die Kassettenmutagenese insbesondere z​um kompletten Austausch kleinerer Fragmente d​es codierten Proteins genutzt.

Literatur
  • Wells J.A., Vasser M., Powers D.B.: Cassette mutagenesis: an efficient method for generation of multiple mutations at defined sites. In: Gene. 34, Nr. 2–3, 1985, S. 315–23. doi:10.1016/0378-1119(85)90140-4. PMID 3891521.
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